當(dāng)前位置：小鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶（iNOS）試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
細(xì)辛醛英文名稱(chēng)：Asarylaldehyde：14374-62-0分子式：196.19988
仙茅苷英文名稱(chēng)：Cents a：85643-19-2分子式：466.44
相思豆堿 英文名稱(chēng)：Acacia base：21339-55-9分子式：218.25
香蒲新苷英文名稱(chēng)：Typhaneoside：104472-68-6分子式：770.68528
香葉木素英文名稱(chēng)：Diosmetin：520-34-3分子式：300.26
小豆蔻明英文名稱(chēng)：Adzuki beans Kou Ming：19309-14-9分子式：207.28
辛弗林英文名稱(chēng)：Synephrine：1994/7/5分子式：167.20502
辛可尼丁英文名稱(chēng)：Sin Coenen Martin：485-71-2分子式：294.39
辛可寧英文名稱(chēng)：Xin Kening：118-10-5分子式：294.39
辛夷脂素英文名稱(chēng)：Fargesin：31008-19-2分子式：370.39578
新綠原酸英文名稱(chēng)：Neochlorogenic acid：906-33-2分子式：354.31
新芒果苷英文名稱(chēng)：New mango：64809-67-2分子式：584.48022
雄烯二酮英文名稱(chēng)：Two ketones：1963/5/8分子式：286.40854
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